高效液相论文怎么写-如何操作高效液相色谱仪?
作者:毕业通查重 发表时间:2021-09-11 19:19:07 浏览次数:295
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请问高效液相和质谱联用的特点,如何提高高效液相的分析度?
特点是:色谱的优势在于分离,为混合物的分离提供了最有效的选择,但其难以得到物质的结构信息,主要依靠与标准物对比来判断未知物,对无紫外吸收化合物的检测还要通过其它途径进行分析。质谱能够提供物质的结构信息,用样量也非常少,但其分析的样品需要进行纯化,具有一定的纯度之后才可以直接进行分析。因此,人们期望将色谱与质谱联接起来使用以弥补这两种仪器各自的缺点。如何提高了分离度:用更柱效更高的色谱柱,或增加柱长,减小内径,减小粒度,使用梯度,改变流动相
高效液相和超高效液相的区别在那?其实最最重要的部分在于色谱柱的粒径。可以理解成UPLC是因为这种小粒径色谱柱的缘故而改造的。以往的色谱柱规格是5um粒径,比如最普通的C18长柱,规格就是5um,4.6mm*250mm。而超高效液相色谱仪上的柱子的粒径相对较小,比如有3.5um,有3.0um,甚至更小的还有2.0um的。因为粒径小了,所以固定相的表面积就变大了,比如5um的柱子就像是一条满是石头的河流,那么2.0um的柱子就是一条满是细沙的河流了。这样分离样品的速度更快,会很大程度上节省流动相,节省时间。但是相对的仪器的压力也会更高。所以超高效液相色谱仪的主要改良在于它的泵,还有各部件的耐压程度。一根小粒径的柱子如果放在普通的液相上,肯定柱压会超过压力上限,而且各个接口肯定会漏液。如果超高效液相色谱仪就可以很好地使用这种小粒径的色谱柱,从而节约成本,更快更好地完成实验。
如何操作高效液相色谱仪?
高效液相色谱仪操作步骤如下:
1、 过滤流动相,根据需要选择不同的滤膜.
2 、对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。
3 、打开hplc工作站(包括计算机软件和色谱仪),连接好流动相管道,连接检测系统。
4 、进入hplc控制界面主菜单,点击manual,进入手动菜单。
5、有一段时间没用,或者换了新的流动相,需要先冲洗泵和进样阀。
6、调节流量,初次使用新的流动相,可以先试一下压力,流速越大,压力越大,一般不要超过2000。
7、设计走样方法。
8 、进样和进样后操作。
9 、关机时,先关计算机,再关液相色谱。
10 、填写登记本,由负责人签字。
11、流动相均需色谱纯度,水用20m的去离子水。
12 、柱子是非常脆弱的,第一次做的方法,先不要让液体过柱子。
13、所有过柱子的液体均需严格的过滤。
14、 压力不能太大,最好不要超过2000 psi。
高效液相色谱法(HighPerformanceLiquidChromatographyHPLC)又称“高压液相色谱”、“高速液相色谱”、“高分离度液相色谱”、“近代柱色谱”等。它是在生化和分析化学中常用的柱层析仪。 高效液相色谱是色谱法的一个重要分支,以液体为流动相,采用高压输液系统,将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱,在柱内各成分被分离后,进入检测器进行检测,从而实现对试样的分析。 该方法有效方便快捷地解决化学、医学、工业、农学、商检和法检等学科领域中得出想要的数据,成为重要的分离分析技术。
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